Regeneración y expresión transitoria por agroinfección del Gen Gusint a partir de callos obtenidos de embriones maduros de maíz (Zea mays L.)
/por Javier García Ruíz; director de tesis José Oscar Mascorro Gallardo.
- 1 recurso en línea (94 páginas): cuadros, figuras.
RESUMEN Se desarrollo un método de regeneración eficiente de plantas de maíz mediante el uso de nudos cotiledonares aislados de semillas maduras de líneas desarrolladas para el Valle de México en la UACh. Primero, se desarrollo un método de desinfestación de semillas y embriones, para luego evaluar la capacidad de respuesta a la formación de callo tipo I de cada una de las líneas utilizadas. Se evaluaron cuatro medios de cultivo distintos: el N6C1SN, MPC, HW y MSW57 en tres diferentes explantes: ápices, plúmulas y nudos cotiledonares. La línea que mejor respondió a la formación de callo tipo I en casi todos los medios evaluados fue la línea Chbl2, sobresaliendo con un 43% en el medio MSW57 y la línea CML-72 con un 36.6%. Al realizar el subcultivo de los callos, no crecieron favorablemente en sus respectivos medios de mantenimiento reportados por lo que se hicieron evaluaciones posteriores y solo callos de la línea Chbl2 pudo incrementase en el medio N6C1SN y regenero brotes (2 brotes por callo) al ser cultivada en el medio MSRII con 1 mg.L-1 de kinetina Adicionalmente para determinar las mejores condiciones de transformación por agroinfección, se hicieron algunos ensayos de expresión transitoria combinados con vacio y sonicación, usando el gen reportero GUS logrando la mayor tinción (3.5 en una escala de 1 a 5) de los callos al utilizar 30 minutos de vacio y 5 minutos de sonicacion. Palabras clave: agroinfección., embriones maduros, maíz, regeneración.