Aislamiento e identificación morfológica y molecular de cepas nativas de la bacteria entomopatógena Paenibacillus popilliae / por Guadalupe Tlalolini Dector y Dariana Yamileth Castro Castillo; presidente Manuel Alejandro Tejeda Repes; secretario Marcelino Martínez Nuñez; vocal Raquel Alatorre Rosas; suplente Candelario Santillan Ortega; suplente Jaime Alfredo Urzúa Gutiérrez
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TextPublisher: Chapingo, México : El autor, 2023Description: 1 recurso en línea (56 páginas): Ilustraciones, tablasContent type: - texto
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Ingeniero Agrónomo Especialista en Parasitología Agrícola Departamento de Enseñanza, Investigación y Servicio en Parasitología Agrícola, 2023 Licenciatura
Incluye referencias bibliográficas: páginas 50-56
En la presente tesis fue posible aislar e identificar morfológica y molecularmente cepas nativas de la bacteria entomopatógena Paenibacillus popilliae con la finalidad de evaluar su potencial como insecticida biológico para plagas de importancia agrícola como son las larvas del complejo “gallina ciega”; plaga rizófaga conformada por especies de los géneros Phyllophaga, Cyclocephala y Anomala, pertenecientes al orden Coleoptera. Se realizaron distintas colectas de ejemplares de “gallina ciega” en los ciclos agrícolas 2021 y 2022, en las localidades de “Tierras Negras”, “El caracol” y “El Garbanzo”, Guanajuato, México. Se realizó diagnóstico de la Enfermedad lechosa tipo A y B, de acuerdo con el aspecto blanco lechoso y coloración marrón, respectivamente. Los aislamientos en medio CP contribuyeron a las pruebas morfológicas en donde resultaron Gram positivas las 14 cepas obtenidas, el 93 % de las cepas presentaron colonias con la siguiente descripción: Forma irregular, elevación ligeramente elevada, superficie rugosa, borde ondulado, densidad opaca y color blanco cremoso. Ahora bien, el 7 % restante se diferenció respecto a las anteriores. Estas colonias presentan forma circular, elevación convexa, superficie lisa, borde entero, densidad opaca y color blanco cremoso. Finalmente se realizaron bioensayos para corroborar la patogenicidad de Paenibacillus popilliae, sin embargo, se requiere de más evaluaciones para generar información consistente. La extracción de DNA se realizó siguiendo el protocolo de Green y Sambrook, 2017. Mediante la técnica de PCR se realizó la amplificación del marcador molecular 16s. Los productos de PCR obtenidos se secuenciaron en la Unidad de Secuenciación de la UNAM (USSDNA, UNAM, México). Las secuencias obtenidas se analizaron in-sílico mediante el software BioEdit 2 (ver.7.0.5.2). La reconstrucción filogenética se realizó mediante el método de máxima verosimilitud empleando el software MEGA versión 4.0.
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